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影响环孢霉素内标的结果有以下三方面因素

发布时间:2021-04-23   点击次数:102次
  环孢霉素内标是将一定重量的环孢霉素作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按公式即可求出被测组分在样品中的百分含量。内标法是色谱分析中一种比较准确的定量方法,尤其在没有标准物对照时,此方法更显其优越性。
 
  定义:将一个已知质量的纯物质,加入至待测样品溶液中,以此纯物质的量为标准,对比测定待测组分的含量,该纯物质称为内标物。
  选择要求:
  1、原样品中不含组分;
  2、与待测物保留时间应接近,但不重叠;
  3、为高纯度标准物质,或含量已知物质;
  4、在给定色谱条件下具有一定化学稳定性。
 
  影响因素:
  影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
  由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
  化学方面的因素包括:
  1、内标物在样品里混合不好;
  2、内标物和样品组分之间发生反应,
  3、内标物纯度可变等。
  对于一个比较成熟的方法来说,色谱方面的问题发生的可能性更大一些,色谱上常见的一些问题对绝对面积的影响比较大,对面积比的影响则要小一些,但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度,那么一定有某个重要的色谱问题存在,比如进样量改变太大,样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别,检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变,这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠,而色谱柱看来也是正常的话,应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是:面积比可变,而峰高比保持相对恒定。

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