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分享一些关于前处理96孔板铺板的小技巧

发布时间:2021-05-24   点击次数:101次
  刚开始用前处理96孔板种细胞时细胞总是分布不均匀,第二天就会发现有些地方出现堆积性生长,而还有不少地方细胞则很稀疏,细胞密集的地方因细胞与细胞之间的接触抑制影响细胞的生长,这样就很难评价干预因素对细胞的作用,因此将前处理96孔板种均匀也是进行后续实验的前提,将我以前用的老办法和最后用的新方法比较一下,以让大家看看各自优缺。

 

  1、老方法:种过板子后,用手将前处理96孔板平拿起,左右晃动几下,然后再前后晃动几下,不过这种方法5个复孔中总有2-3个孔中细胞分布不均匀,多数情况下是孔的中间出现成堆分布,为此苦恼了一阵子。还又一次见一师姐将种好的板子放在摇床上摇了几分钟,结果更惨了,细胞全部跑到中间了。
  一般前处理96孔板我每孔是加100微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入,加完半边板后,将未加的细胞悬液混一下再,继续加剩余的半边板子,都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度,太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。
 
  2、新方法:这种方法简直是太好了,种的很均匀。先用移液枪将吹打均匀的细胞吸起来,让后将枪头紧贴着孔的一侧壁,然后将枪头中的细胞缓缓的打下去,种好之后千万不要摇晃板子,直接放到显微镜下看就可以了,此方法可以说是100%的有效吧。 希望对大家有帮助。
  补充:从6孔板到96空板要细胞分散均匀,先用培养基把细胞稀释好,再把培养板放在适当的位置,加入细胞时和加入细胞后不移动培养板;如果空中有的地方没有培养基可吹打,但不要移动培养板,加入细胞后静置20-30分钟再移入培养箱。这样细胞一般都能长的很均匀。当然,前提是细胞消化的很好。

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